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Abdulkadir Kalender
Heterologe Expression der Arabidopsis SPX und PHR1 Gene in E.Coli
Klonierungsmethode im genetischen Labor
2017. 56 S. 220 mm
Verlag/Jahr: AV AKADEMIKERVERLAG 2017
ISBN: 6-202-20599-7 (6202205997)
Neue ISBN: 978-6-202-20599-3 (9786202205993)
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In diesem Buch wird die Klonierung und Überexpression der Phopsphatregulierenden Gene (SPX) in E.coli Bakterien beschrieben. Phosphate werden vor allem für Plasmalemma, Energieübertragungen als auch die Förderung der Blüten- und Fruchtbildung und vor allem für DNA und Proteine benötigt. In dieser Arbeit wird untersucht, ob es möglich ist, die SPX-Proteine in E.coli zu exprimieren, zu isolieren und zu testen, ob diese einzeln oder zusammen mit dem Transkriptionsfaktor PHR1 (Phosphat Starvation Response 1) P, bzw P Metabolismus relevante Moleküle binden. Hierfür wurden unterschiedliche Methoden angewandt. Die SPX-Proteine, sprich die Inserts wurden vom pJET-Vektor entnommen und ins pET-22b-Vektor ligiert. Anschließend wurden diese klonierten Plasmide in kompetente E.coli BL21 Zellen transformiert und angereichert. Die Zellen wurden durch die Zentrifuge aufgeschlossen, des weiteren wurden die SPX-Proteine durch die Nickel-Affinitätschromatographie aufgereinigt. Schließlich wurde über MALDI-TOF Massenspektrometrie Proteinsequenzüberseinstimmung ermittelt.
Kalender, Abdulkadir
- Abschluss Biologie, Uni Hamburg 2017- Schwerpunkte: Molekulare Pflanzengenetik (Klonierung), Neurobiologie- Karate Weltmeister (2013,2017) & Vize Bundestrainer (ISKA)- Beherrscht sieben Sprachen- Derzeit als Lehrer (Honorarbasis) tätig